Tude D Une Int Grase D Int Gron Chromosomique Et Des Introns Du Groupe Iic Attc Dans Le Cadre De L Volution Des Int Grons

Alphaherpesviruses

Alphaherpesviruses are a fascinating group of DNA viruses that includes important human pathogens such as herpes simplex virus type 1 (HSV-1), HSV-2, and varicella-zoster virus (VZV): the causative agents of cold sores, genital ulcerous disease, and chickenpox/shingles, respectively. A key attribute of these viruses is their ability to establish lifelong latent infection in the peripheral nervous system of the host. Such persistence requires subversion of the host's immune system and intrinsic antiviral defense mechanisms. Understanding the mechanisms of the immune evasion and what triggers viral reactivation is a major challenge for today's researchers. This has prompted enormous research efforts into understanding the molecular and cellular biology of these viruses. This up-to-date and comprehensive volume aims to distill the most important research in this area providing a timely overview of the field. Topics covered include: transcriptional regulation, DNA replication, translational control, virus entry and capsid assembly, the role of microRNAs in infection and oncolytic vectors for cancer therapy. In addition there is coverage of virus-host interactions, including apoptosis, subversion of host protein quality control and DNA damage response pathways, autophagy, establishment and reactivation from latency, interferon responses, immunity and vaccine development. Essential reading for everyone working with alphaherpesviruses and of interest to all virologists working on latent infections.

Étude d'une intégrase d'intégron chromosomique et des introns du groupe IIC-attC dans le cadre de l'évolution des intégrons

Étude d'une intégrase d'intégron chromosomique et des introns du groupe IIC-attC dans le cadre de l'évolution des intégrons

Les intégrons sont des éléments génétiques permettant la capture et l'expression de gènes sous la forme d'unités fonctionnelles nommées cassettes. Une cassette d'intégron est généralement constituée d'un gène suivi d'une séquence de recombinaison nommée site attC. Les cassettes sont mobilisables par un mécanisme de recombinaison spécifique de site qui est catalysé par une intégrase d'intégron. Les intégrons présents sur des éléments mobiles (les intégrons mobiles) sont grandement impliqués dans l'acquisition, l'expression et la dissémination des gènes de résistance aux antibiotiques dans les bactéries à Gram négatif. Malgré toutes les informations dont nous disposons sur les intégrons, les origines des gènes codant pour les intégrases d'intégrons (intl) retrouvés dans les intégrons mobiles demeurent imprécises. De plus, le mécanisme de formation des cassettes reste inconnu. Plusieurs indices suggèrent que les gènes intl retrouvés dans les intégrons mobiles proviennent de ceux présents dans les intégrons retrouvés dans les chromosomes de bactéries environnementales (les intégrons chromosomiques). D'autre part, des éléments génétiques mobiles ciblant les sites attC, nommés introns du groupe UC-attC, pourraient contribuer au recrutement des gènes en les associant avec des sites attC. Les objectifs principaux des travaux de cette thèse ont été divisés en deux volets : i) l'étude des activités de recombinaison d'une intégrase d'intégron chromosomique et ii) l'étude des introns bactériens du groupe UC-attC, dans le cadre de l'évolution des intégrons. L'objectif du premier volet de cette thèse consistait en l'étude des activités d'excision et d'intégration de l'intégrase IntINeu de l'intégron chromosomique de la bactérie environnementale Nitrosomonas europaea ATCC 19718 à l'aide d'un test de recombinaison in vivo. Les objectifs du deuxième volet consistaient en l'étude des introns du groupe UC-attC afin a) de caractériser les promoteurs internes permettant l'expression de cassettes de résistance aux antibiotiques, b) de définir les principes de base de la reconnaissance des séquences cibles (les sites attC), et c) de déterminer leur rôle potentiel dans la formation des cassettes d'intégrons. Les résultats obtenus dans le premier volet ont révélé que l'intégrase IntINeu peut capturer plusieurs cassettes de résistance aux antibiotiques retrouvées dans des intégrons mobiles. Ces résultats suggèrent que les gènes intl retrouvés dans les intégrons mobiles proviennent de ceux présents dans les intégrons chromosomiques de bactéries environnementales. Les résultats obtenus dans le deuxième volet ont révélé que les introns du groupe UC-attC possèdent potentiellement un ou deux promoteurs conservés permettant, à l'occasion, l'expression de cassettes de résistance aux antibiotiques. Ensuite, les études de mobilité de l'intron du groupe UC-attC S.ma.12 provenant d'un isolât clinique de Serratia marcescens ont révélé l'importance de la structure secondaire conservée des sites attC dans la reconnaissance des séquences cibles. Des expériences additionnelles de mobilité ont permis de démontrer que S.ma.12 peut cibler une variété de séquences correspondant à des sites attC, mais également à de possibles terminateurs de transcription. Des études in vitro ont révélé, pour certains des introns à l'étude, les produits d'épissage des exons, les activités de transcription inverse, de même que les activités ADN polymerase de protéines introniques purifiées. Les résultats obtenus dans le deuxième volet de cette thèse ont permis d'élaborer un modèle concret du mécanisme de formation des cassettes d'intégrons.